Правила забора материала для микробиологического исследования
Правила забора материала для микробиологического исследования
Биологический материал целесообразно получать до начала антимикробной терапии.
- Материал для бактериологического исследования берут непосредственно из очага инфекции или исследуют клинически значимый биологический материал.
- Необходимо соблюдать асептику, избегая контаминации биологического материала посторонней микрофлорой.
- Количество материала должно быть достаточным для проведения исследования.
- Собирают материал в стерильную посуду с пробками, полученную в микробиологической лаборатории: для взятия отделяемого из раны, мазков со слизистых оболочек, из глаза, уха, носа, зева, цервикального канала, влагалища, анального отверстия следует использовать стерильные ватные тампоны, для крови, гноя, спинномозговой жидкости и экссудатов используют стерильные шприцы и специализированные транспортные среды, для мокроты, мочи и кала - стерильные плотно закрывающиеся небьющиеся контейнеры.
Внимание: необходимо следить за сроками годности посуды, полученной в лаборатории. Если посуда, стерилизуемая в лаборатории, не использована в срок, указанный на этикетках её необходимо вернуть в лабораторию для повторной стерилизации.
- Нативный материал доставляют в лабораторию в максимально короткие сроки (для большинства образцов не позднее 1,5-2 ч после их получения). Допускается хранение материала в холодильнике при 4° С (это не относится к биологическому материалу, полученному из стерильных в норме локусов: ликвору, крови, внутрисуставной и плевральной жидкости!).
- При использовании транспортных сред биологический материал можно хранить в течение 24 ч.
- Жидкий биологический материал можно транспортировать непосредственно в шприце, на кончик которого надет стерильный колпачок или загнутая под углом игла.
- Для исследования на анаэробы биологический материал необходимо помещать в анаэробные условия. Для жидких образцов (кровь, гной, экссудат, жидкости из стерильных полостей) используют специальные флаконы с жидкой питательной средой, заполненные газовой смесью определенного состава, куда из шприца уколом иглы через резиновую плотно завальцованную крышку вносят материал. Можно использовать анаэробные коммерческие тампоны с транспортной средой.
- Транспортировка осуществляется в металлических биксах (пеналах), термоконтейнерах, которые должны легко подвергаться обработке.
- К материалу прилагают сопроводительный документ, где указывают наименование, источник и метод получения биологического материала, дату и время его взятия; ФИО, пол и возраст больного; название учреждения, отделения, № палаты; предполагаемый диагноз инфекционной патологии и предшествующую антибактериальную терапию; фамилию и подпись врача, направившего материал для проведения бактериологического исследования.
Внимание: погрешности в правилах сбора материала для микробиологического исследования приводят к ошибкам в диагностике возбудителя и определении его антибиотикочувствительности.
Исследование крови
- Для взятия крови используют стерильные шприцы или системы для одноразового пользования.
- Кровь берут во время подъёма температуры из периферической вены с соблюдением правил асептики и мер индивидуальной защиты, предусмотренных при работе с кровью (использовать резиновые перчатки).
- Кровь засевают в питательные среды сразу после взятия у постели больного или процедурной.
- Перед использованием флаконов визуально определяют прозрачность среды, любое помутнение свидетельствует об их непригодности.
- При подозрении на анаэробную инфекцию необходимо одномоментно собирать кровь в два флакона – с питательными средами для аэробного и анаэробного культивирования.
- Не следует брать кровь из сосудистых катетеров, кроме случаев, когда предполагается инфекция катетерного происхождения.
Забор и посев крови
Для предотвращения контаминации кожу пациента над пунктируемой веной тщательно обработать следующей последовательности:
- 70% этиловым спиртом (или заменяющим его антисептиком)
- 5% настойкой йода (или йодопирона, йодоната, хлоргексидина) начиная обработку от центра будущего прокола к периферии - 30 секунд
- этиловым 70% спиртом (или заменяющим его антисептиком)
- дают высохнуть обработанному участку кожи
- не пальпируя вену повторно, производят венепункцию
- вновь обрабатывают участок 70% этиловым спиртом (или заменяющим его антисептиком).
- При аллергической реакции на йод кожу дважды обрабатывают 70% этиловым спиртом (или заменяющим его антисептиком).
Использование сред, приготовленных в лаборатории:
Среды в стеклянных флаконах, закрытые стерильными ватно-марлевыми пробками и предохранительными стерильными бумажными колпачками:
- двухфазная среда» (комбинация плотной и жидкой среды в одном флаконе) – для роста аэробных микроорганизмов
- полужидкие специальные среды - для роста анаэробных микроорганизмов
- Посев осуществляют во флаконы со средами над пламенем спиртовой горелки.
- Взятие и посев крови осуществляют два человека – в то время как один обрабатывает кожу пациента, пунктирует вену и берёт кровь, другой - над пламенем спиртовки
- Открывает пробки флаконов, подставляет флаконы со средой под струю крови из шприца или системы, обжигает горлышки и пробки флаконов и закрывает их.
- Рекомендуемое соотношение объёмов крови и среды 1:10 (10 мл у взрослых, 5 мл у детей)
Использование коммерческих сред:
- для аэробных микроорганизмов (с зелёной крышкой)
- для анаэробных микроорганизмов (с красной крышкой)
- педиатрические флаконы – (с жёлтой крышкой) для исследования крови в объёме до 5 мл
- Снимают предохранительную пластиковую крышку.
- Дезинфицируют резиновую пробку флакона 70% этиловым спиртом (или заменяющим его антисептиком).
- Дают просохнуть обработанной поверхности.
- Прокалывают пробку флакона иглой шприца и производят посев крови.
- Объём исследуемой крови по прилагаемой инструкции - обычно 10-30 мл для взрослых и 1- 5 мл для детей до 12 л (метка на этикетке флакона позволяет оценить объём взятой крови).
- Сначала производят посев в «анаэробный» флакон, затем – в «аэробный» во избежание попадания воздуха из шприца.
- Перемешивают осторожно круговыми движениями содержимое флакона.
- Маркируют флаконы и до транспортировки в лабораторию содержат в термостате или при комнатной температуре в защищённом от света месте (не в холодильнике!!)
- Исследования крови и других жидкостей организма с помощью анализатора культур крови BacT/ALERT-
При отсутствии в отделении флаконов для гемокультур.
- В исключительных случаях, при экстренной ситуации допускается использование 20-миллилитрового шприца с иглами.
- В шприц предварительно набирают 0,5-0,7 мл стерильного гепарина.
- Заменяют иглу.
- Затем пунктируют вену, соблюдая правила асептики. Набирают 10-15- мл крови.
- Перемешивают осторожным покачиванием с гепарином (иглу со шприца не снимают).
- В этом же шприце с согнутой у основания иглой (или надетым стерильным колпачком) немедленно отправляют в лабораторию.
Исследование сосудистого катетера
- Исследуют при подозрении на инфекцию катетерного происхождения.
- В асептических условиях отрезают его дистальный (внутрисосудистый) конец около 5 см длиной.
- Помещают в стерильный контейнер (пробирку).
- Доставляют в лабораторию немедленно.
- Важно не допускать высыхания образца.
Исследование ликвора
- Спинномозговую жидкость получают при люмбальной пункции или пунции боковых желудочков мозга в объеме 3 -5 мл, помещают в стерильную, желательно центрифужную пробирку и немедленно доставляют в лабораторию.
- Полученную пробу доставить в лабораторию, избегая чрезмерного перегрева и особенно охлаждения (может быть использован термос). Охлаждение ликвора ниже 300 ведёт к гибели менингококков.
- При невозможности немедленно доставить в лабораторию ликвор сохраняют при 370 в термостате.
- При использовании коммерческих сред (BacT/ALERTFA и др.) свежевзятый ликвор в количестве 5-10 мл из шприца, проколов резиновую пробку, вносится во флакон со средой (см. исследование крови).
Исследование жидкостей организма из стерильных в норме полостей
- Исследуют перитонеальную, синовиальную, плевральную, суставную, перикардиальную жидкости.
- Для бактериологического исследования используют жидкости, взятые при пункции и аспирации.
- Попавшие в шприц пузырьки воздуха удаляют и помещают жидкость в анаэробную транспортную систему или отправляют её в шприце, предварительно сняв (или загнув) иглу или надевают на канюлю защитный стерильный колпачок.
- Минимальный объём жидкости для выделения бактерий 1-5 мл, для выделения грибов или микобактерий не менее 10 мл.
- Избыток жидкости или гной транспортировать в стерильных контейнерах с завинчивающейся крышкой.
- Взятие материала тампоном не предохраняет анаэробы от воздействия кислорода воздуха, не позволяет приготовить качественный препарат для микроскопии, не гарантирует выделение культуры при незначительном количестве микробов в образце.
- Не рекомендуется использовать антикоагулянты (цитрат, этилендиаминтетрауксусную кислоту), подавляющие рост некоторых видов бактерий.
- При необходимости лучше использовать гепарин.
- При достаточном количестве жидкости можно производить посев из шприца во флаконы со средой для гемокультур в соотношении 1:5 - 1:10 (5-10 мл). Однако при этом становится невозможной прямая бактериоскопия материала, а сроки идентификации удлиняются на сутки в сравнении с изолятами, выделенными при первичном посеве на плотные среды.
Исследование материала при раневой инфекции
- Взятие материала производит лечащий врач во время операции или перевязки.
- В большинстве случаев исследуют поражённые ткани и аспираты.
- Наиболее правильный способ взятия жидких материалов – объёмно с помощью стерильного шприца. Отбор материала тампоном производят только при невозможности осуществления объёмного метода.
- Промыванием раневой поверхности физ. раствором удаляют местно применяемые антисептические и антибактериальные препараты.
- Кожу вокруг раны обрабатывают спиртом или другим антисептиком, некротические массы, детрит, гной удаляют стерильной сухой салфеткой.
- Все ёмкости с отобранным материалом плотно закрывают стерильными пробками.
- Доставляют в лабораторию в течение 1 часа. При невозможности доставить материал в течение этого времени, он должен храниться в холодильнике, но не более 2 часов.
Можно использовать специальные транспортные контейнеры и пробирки со средами. На транспортной среде материал хранится 24 часа.
Отделяемое открытых инфицированных ран
Материал берут двумя стерильными тампонами (один для посева, второй - для бактериоскопии) круговыми вращательными движениями от центра к периферии поражённого участка помещают в стерильную пробирку.
Отделяемое из дренажей.
- Берут стерильным шприцем и в количестве 1-2 мл помещают в стерильную пробирку или доставляют в шприце.
- Можно использовать для исследования концы удалённых дренажных трубок
Кусочки тканей
Помещают в другую плотно закрывающуюся стерильную ёмкость (пробирку), содержащую небольшое количество стерильного физ. раствора.
Глубокие раны или абсцессы.
- Поверхность раны дезинфицируют 70% этиловым спиртом, затем 1-2% йодным раствором.
- Материал берут из глубины, избегая контаминации поверхностной микрофлорой раны.
Биоптат с ожоговой поверхности
Поверхность раны дезинфицируют и берут образец с помощью пункционной биопсии (3-4 мм) для количественного исследования.
Язвы и узелковые утолщения
- Пораженную область кожи дезинфицируют, удаляют поверхностный слой и делают соскоб со дна язвы или узелкового утолщения.
- Если имеется экссудат, его собирают шприцем или стерильным тампоном.
Раны после укусов
- Гнойное содержимое из раны получают шприцем после надреза, дренирования или поверхностной обработки инфицированной раны.
- При свежих укусах бактериологическое исследование не проводят, так как в этот период трудно выделить этиологически значимый микроорганизм.
Кости
- Материал получают при оперативном вмешательстве. Образец помещают в стерильный контейнер без формалина и других консервантов.
- Для предотвращения высыхания образца в контейнер может быть добавлен стерильный физ.раствор.
Материал при инфекциях верхних дыхательных путей
Образцы из зева
- Исследуют прежде всего для выявления α-гемолитических стрептококов группы А, H.influenzae( при эпиглотитах).При наличии специфического анамнеза проводят исследование для исключения гонококковой этиологии фарингита.
- Не следует брать материал при воспалённом надгортаннике, так как может возникнуть обструкция дыхательных путей!
- Мазок из зева следует брать до еды или через 2 - 3 часа после приёма пищи. Перед взятием пробы больному необходимо прополоскать рот тёплой кипячёной водой.
- Аккуратно прижимая язык шпателем, вводят стерильный тампон между дужками миндалин и язычком.
- Движением тампона вперёд и назад собирают материал с задней поверхности глотки, миндалин и участков воспаления или изъязвления слизистой.
- Тампон помещают в стерильную пробирку, при необходимости используя транспортную среду.
Внимание: При взятии пробы со слизистой зева (глотки) нельзя касаться щёк, языка, дёсен, а также собирать слюну.
Взятие материала при исследовании на возбудителей дифтерии.
- Для взятия материала используют стерильные ватные сухие тампоны.
- Материал из ротоглотки и носа берут отдельными тампонами, натощак или не ранее, чем через 2 часа после еды, при хорошем освещении с использованием шпателя, не касаясь тампоном языка, слизистых щек и зубов.
- При наличии налетов материал следует брать с границы пораженных и здоровых тканей, слегка нажимая на них тампоном.
- Для взятия материала из носа используют один тампон, который вводят сначала в один, а потом в другой носовой ход, не касаясь крыльев носа снаружи
- Необходимо обеспечить доставку материала в лабораторию не позднее 2-х часов, а при использовании глицериновых тампонов - в течение 4-х часов.
Бактериологическое исследование носоглоточной слизи на менингококки
- Исследуемый материал берут из задней стенки носоглотки натощак или через 3 - 4 часа после еды стерильным ватным тампоном, укрепленным на изогнутой проволоке.
- Материал берут с обязательным надавливанием шпателем на корень языка. Тампон вводят концом кверху за мягкое небо в носоглотку и проводят 2 -3 раза по задней стенке.
- При извлечении тампон не должен касаться зубов, слизистой щек, языка и язычка.
- Материал может быть взят смоченным тампоном, который затем доставляют в лабораторию.
- Питательную среду для смачивания тампонов получают в бактериологической лаборатории. Можно использовать специальные транспортные среды.
- Полученную пробу доставить в лабораторию, избегая охлаждения
Мазок со слизистой передних отделов полости носа.
- Исследование обычно проводится для выявления носительства метициллинрезистентных штаммов S.aureus.
- Мазок со слизистой носа берут одним стерильным тампоном.
- Тампон вводится сначала в здоровую ноздрю до упора на уровне носовой раковины и вращательными движениями собирают материал со слизистой. Повторяют процедуру в другом носовом ходе.
- Тампон помещают в стерильную пробирку.
Аспират из придаточных пазух
- Исследуют при бактериальных синуситах помимо исследования микрофлоры носовой полости.
- Материал отсылают в лабораторию в анаэробной транспортной среде или непосредственно в шприце.
- He рекомендуется исследовать промывную жидкость из носоглотки, так как образцы контаминируются нормальной микрофлорой верхних дыхательных путей, что не позволяет правильно трактовать результаты анализа.
- При хронических синуситах возможен прицельный забор материала для микробиологического исследования с использованием эндоскопов.
Исследование отделяемого уха
Жидкость при тимпаноцентезе
- Исследуют при среднем отите в случаях, если первичная терапия оказалась безуспешной или если тимпаноцентез проводился как лечебная процедура.
- Очищают наружный слуховой проход слабым раствором детергента, после прокола барабанной перепонки врач-отоларинголог шприцем собирает жидкость и помещает ее в стерильный контейнер или отправляет в лабораторию в шприце с загнутой иглой или с защитным колпачком.
- При невозможности своевременной доставки целесообразно использовать транспортную среду.
- При самопроизвольной перфорации барабанной перепонки экссудат собирают стерильным тампоном, используя слуховое зеркало. Однако в этом случае высока вероятность контаминации биологического материала эндогенной микрофлорой.
Материал при воспалении наружного уха.
- Обрабатывают кожу 70% этиловым спиртом и промывают стерильным изотоническим раствором хлорида натрия (физраствором).
- Материал из очага берут стерильным ватным тампоном. Тампон помещают в стерильную пробирку.
- При поражении среднего и внутреннего уха исследуют пунктаты и материал, полученный во время оперативных вмешательств, собранные в стерильную пробирку или транспортную среду.
Исследование отделяемого глаз.
- Накануне, за 6-8 часов (на протяжении ночи, предшествующей забору материала) отменяют все медикаменты и процедуры.
- Материал забирают с пораженных мест в разгар воспалительного процесса с соблюдением правил асептики.
Отделяемое с конъюнктивы
- Берут стеклянными стерильными палочками или платиновой петлей, предварительно фламбированной в пламени спиртовки и остуженной и погружают в 0,2 % сахарный бульон.
- При наличии достаточно обильного гнойного отделяемого использую стерильные ватные тампоны (желательно коммерческие), которыми берут гной с внутренней поверхности нижнего века движением к внутреннему углу глазной щели.
- Необходимо следить, чтобы при моргании ресницы не касались тампона (придерживать веки руками)
Край век.
Корочки гноя удаляют пинцетом. Берут материал из язвочки у основания ресниц.
Роговица.
- Материал на исследование после обезболивания, можно взять платиновой петлёй или другим подходящим инструментом.
- Если пациент применяет контактные линзы, необходимо исследовать их внутреннюю поверхность.
- В кабинете врача производят посев на питательный бульон.
- Пробы клинического материала доставить в лабораторию не замочив пробки, чтобы не исказить результат исследования.
Материал при инфекциях нижних дыхательных путей
Мокрота.
- Исследуют свободно откашливаемую мокроту, утреннюю порцию, натощак
- Пациент предварительно должен почистить зубы, дёсны, язык, слизистую оболочку щёк зубной щёткой и прополоскать рот кипяченой водой.
- Если мокрота отделяется плохо, накануне пациенту дают отхаркивающие средства или проводят ингаляцию физ. раствором.
- Мокроту собирают в стерильную посуду с крышкой.
- Сроки доставки мокроты в лабораторию не должны превышать 1,5-2 часа от момента её получения (допускается хранение в холодильнике, но не более 6 часов), т.к. задержка ведёт к аутолизу S.pneumoniae, а за счёт размножения бактерий-контаминантов меняется истинное соотношение микрофлоры бронхиального секрета.
Качество собранной мокроты можно оценить по данным микроскопии нативных мазков по Граму.
При наличии в мазке мокроты более 10 эпителиальных клеток в поле зрения и менее 25 полиморфно-ядерных лейкоцитов (ПЯЛ) при малом увеличении микроскопа (объектив Х10) высока вероятность контаминации образца содержимым полости рта (слюной). Дальнейшее исследование такого материала нецелесообразно, материал необходимо взять повторно.
Трахеобронхиальные смывы
- Исследуют при отсутствии мокроты или невозможности её выделить естественным путём.
- Специальным шприцем в трахею вводят около 10 мл стерильного физ. раствора и собирают откашливаемый смыв в стерильную посуду.
- Бронхиальные смывы, в том числе вблизи очага воспаления, могут быть сделаны с помощью бронхоскопа.
- Недостатком является очень часто значительное разведение трахеобронхиального содержимого, что снижает возможность выделения бактерий, а концентрация их падает примерно в 100 раз по сравнению с мокротой.
Плевральная жидкость.
- Кожу перед пункцией обрабатывают 70% этиловым спиртом, затем спиртовой настойкой йода, затем опять спиртом.
- После прокола жидкость собирают шприцем в стерильную пробирку и незамедлительно отправляют в лабораторию.
- Допускается посев плевральной жидкости (по 5 мл) в аэробные и анаэробные флаконы, используемые для исследования крови.
Моча при инфекциях мочевыводящих путей
- Исследуют утреннюю среднюю порцию (10-20мл) свободно выпущенной мочи (за ночь концентрация бактерий в мочевом пузыре возрастает).
- Не следует принуждать пациента к приему жидкости для форсирования диуреза, так как происходит разбавление мочи и снижение числа бактерий.
- Для сбора мочи используют стерильные ёмкости которые закрываются резиновой стерильной пробкой. Нельзя собирать мочу из мочеприемника или судна.
- Перед взятием мочи проводят тщательный туалет наружных половых органов с мылом и кипяченой водой во избежание излишней ее контаминации при мочеиспускании нормальной микрофлорой промежности.
- Доставка мочи в лабораторию должна осуществляться в максимально короткие сроки. Посев следует проводить не позднее 2 ч после взятия материала либо в течение 8 ч при условии ее хранения в холодильнике. (При 4°С число бактерий в моче обычно остается стабильным в пределах 24 ч).
- Взятие мочи следует повторить, если нет условий для ее хранения в холодильнике, и с момента взятия образца прошло более 2 часов, в противном случае результаты анализа могут быть недостоверными.
- Недопустимо бактериологическое исследование мочи, собранной в течение суток.
- Не рекомендуется исследовать мочу, полученную при наличии постоянного катетера
Материал при инфекциях урогенитального тракта
Исследование отделяемого женских половых органов
Внимание: взятие материала для микробиологического исследования проводит акушер-гинеколог до проведения мануального исследования
Амниотическаю жидкость
Собирают через катетер, либо аспирируют при кесаревом сечении, либо пунктируют плодный пузырь.
Материал из уретры
- Собирают не ранее, чем через 1 ч после мочеиспускания.
- Отделяемое из уретры собирают стерильным ватным тампоном.
- Если отделяемое получить не удается, наружное отверстие уретры обмывают мылом и ополаскивают кипяченой водой, вводят в уретру тонкий стерильный «уретральный» тампон на глубину 2-4 см, аккуратно вращают его в течение 2 сек., вынимают, помещают в соответствующую транспортную среду и доставляют в лабораторию.
Материал из вульвы, преддверия влагалища
- Берут стерильным ватным тампоном.
- При воспалении бартолиниевых желез производят их пункцию.
Материал из влагалища.
После введения зеркала и подъемника во влагалище материал собирают стерильным ватным тампоном с заднего свода или с патологически измененных участков.
Цервикальный канал.
- Обнажают шейку матки с помощью зеркал и влагалищную ее часть тщательно обрабатывают ватным тампоном, смоченным стерильным физраствором или стерильной водой.
- Тонкий стерильный ватный тампон осторожно вводят в цервикальный канал, не касаясь стенок влагалища, и берут материал.
- Для бактериологческого исследования можно использовать соскоб слизистой, полученный при диагностическом выскабливании стенок цервикального канала.
Матка.
- Правильное взятие материала из матки может быть выполнено только при использовании специальных инструментов типа шприца-аспиратора., имеющего на зонде покрытие.
- После прохождения зондом цервикального канала в полость матки раскрывают наружную оболочку зонда и набирают в шприц содержимое матки.
- Материал из шприца помещают в стерильную пробирку.
Придатки матки.
Материал из очага инфекции (гной, экссудат, кусочки ткани) получают при оперативном вмешательстве или при диагностической пункции опухолевидных образований, проводимой через влагалищные своды.
Приготовление мазков для микроскопии.
- Помимо взятия материала на посев врач-гинеколог готовит мазки для микроскопии (не менее двух - для окраски по Граму и специальными методами), используя отдельные стерильные тампоны или стерильные гинекологические инструменты.
- Предметные стекла, предназначенные для приготовления мазков, маркируют.
- Материал равномерно распределяют на предметном стекле осторожными движениями, избегая грубого втирания и резких штриховых движений инструментом.
- Мазок высушивают при комнатной температуре, покрывают чистым предметным стеклом или помещают его в чашку Петри и отправляют в лабораторию.
- Не допускается хранение влажного мазка между двумя стеклами.
Исследование отделяемого мужских половых органов
Уретра.
- Материал собирают не ранее 2 часов после мочеиспускания.
- Вводят в уретру тонкий стерильный ватный тампон на глубину 2- 4 см, аккуратно вращают его в течение 1-2 сек., вынимают, помещают в транспортную среду и доставляют в лабораторию.
Исследование секрета простаты.
- Перед отбором проб необходимо тщательно вымыть наружные половые органы и область заднего прохода тёплой водой с мылом, затем сполоснуть тёплой водой.
- Проводят массаж простаты через прямую кишку. Материал собирают в стерильную пробирку или стерильным ватным тампоном.
- При наличии симптомов острого простатита массаж простаты не проводят.
- Для получения более достоверных результатов можно дополнить это исследование бактериологическим исследованием мочи, полученной перед и сразу после массажа простаты, что позволит выявить источник инфекции. Основным методом лабораторной диагностики простатита, позволяющим определить локализацию очага инфекции, является метод Meares и Stamey: исследованию подвергают первую порцию мочи, среднюю порцию мочи, секрет простаты и порцию мочи, полученные после массажа предстательной железы (так называемая 4-стаканная проба).
- Пробы клинического материала доставить в лабораторию не замочив пробки, чтобы не исказить результат исследования.
Придатки яичек.
Материал собирают путем аспирации с помощью шприца и иглы.
Язва полового члена.
- Очищают поверхность язвы тампоном, смоченным физ.раствором.
- Производят соскоб язвы до появления серозной жидкости.
- Стерильной салфеткой удаляют жидкость и органические наслоения (следует избегать кровоточивости).
- Надавливают у основания язвы до появления прозрачной жидкости, аспирируют ее шприцем с тонкой иглой, закрывают иглу защитным колпачком и транспортируют в лабораторию.
Соскобы мочеиспускательного канала, шейки матки для исследования на урогенитальный хламидиоз
- Соскобы слизистых оболочек мочеиспускательного канала и шейки матки берут одноразовыми стерильными зондами, «щёточками», ложкой Фолькмана или аналогичными инструментами со слегка затуплёнными краями, соблюдая правила асептики и антисептики.
- Наружные половые органы дезинфицируют, выделения удаляют тампонами или с помощью аспираторов.
- При повышенной чувствительности слизистую оболочку предварительно анестезируют инстилляцией в мочеиспукательный канал 1-2 мл о.5% раствора дикаина.
- Соскобы делают из глубины канала(до 6 см), со всех четырёх квадрантов.
- Соскобы шейки матки берут после удаления слизистой пробки из глубины её канала, а также из влагалищной части шейки матки.
- Соскобы берут осторожно, при лёгком надавливании. В материале должно быть возможно большее количество эпителиальных клеток и минимальное количество слизи, экссудата и примесей крови.
- Соскобный материал распределяют тонким слоем на поверхность 8-миллиметровой лунки чистого обезжиренного предметного стекла так, чтобы все стороны тампона соприкасались с поверхностью стекла.
- Мазок высушивают на воздухе 20-30 минут.
- Допускается хранение мазка на стекле до фиксации 2-3 часа при комнатной температуре.
- Мазки фиксируют соответственно методу окраски.
Материал при исследовании на анаэробы
Общие показания к обследованию: сепсис неясной этиологии, гангрена, абсцессы, флегмона, перитонит, экссудативный плеврит, нагноения ран с подозрением на анаэробную инфекцию, гнойный артрит.
Образцы клинического материала для исследования на анаэробы во избежания контакта с атмосферным воздухом получают при использовании инвазивных методов забора.
Исследуемые материалы: кровь, плевральная, перитонеальная и синовиальная жидкости, гной из абсцессов и других закрытых полостей (если объем гноя превышает 2 мл, то в пробирке под резиновой пробкой сохраняются относительно анаэробные условия в течение нескольких часов), материалы из глубоких отделов свища (после очистки и асептической обработки наружного отверстия) и ран.
Если нет возможности использовать метод аспирации шприцем, материал берут стерильным ватным тампоном, который помещают в анаэробную транспортную среду сохранения и до транспортировки в лабораторию содержат при комнатной температуре;
Фрагменты костной и мышечной тканей размером 1x1 см, взятые из глубокого очага воспаления во время операции (если сроки доставки материалов в лабораторию превышают 15-20 мин, фрагменты тканей погружают в небольшой объем стерильного физраствора).
Не подлежат исследованию на анаэробы: отделяемое поверхностных ран и язв, мазки из зева, носа и ротовой полости,мазки из влагалища и цервикального канала, мокрота и бронхиальные смывы, моча (кроме мочи, полученной надлобковой пункцией мочевого пузыря), содержимое желудка, тонкого и толстого кишечника, фекалии (за исключением предполагаемой Clostridium difficile-ассоциированной диареи).
Исследование фекалий на патогенные и условно-патогенные энтеробактерии и дисбактериоз.
- При исследовании на дисбактериоз пациент за 1-3 дня до взятия пробы должен находиться на диете, исключающей приём продуктов, усиливающих процессы брожения в кишечнике, а также алкоголь, антимикробные лекарственные препараты и т. п.
- Фекалии собирают сразу после дефекации из предварительно обработанного дез. раствором и тщательно промытого водой судна, горшка, специального лотка или с пеленки с помощью стерильной стеклянной палочки, проволочной петли или деревянного шпателя.
- Порцию фекалий помещают в стерильный флакон.
- Объём испражнений для исследования на патогенные энтеробактерии, флору и на дисбактериоз должен составлять 1/3 флакона, объёмом 20 мл.
- При наличии в испражнениях патологических примесей (слизь, хлопья, гной) их следует включать в исследуемую пробу.
- Материал доставляется в лабораторию в кратчайшие сроки
- Испражнения для исследования на патогенные энтеробактерии можно получить непосредственно из прямой кишки с помощью ректальных, ватных или ватно - марлевых тампонов, укрепленных на металлической или деревянной палочке, вводя их круговыми движениями в прямую кишку на 6-8 см.
Исследование желчи (дуоденального содержимого) при инфекциях желчевыводящих путей
- Желчь собирают при зондировании в процедурном кабинете отдельно по порциям: А, В и С (соответственно дуоденальное содержимое, пузырную желчь и желчь из желчных протоков) в три стерильные пробирки, либо во время оперативного вмешательства с помощью шприца в одну пробирку.
- Дуоденальное содержимое и желчь имеют зеленовато - желтый цвет и щелочную реакцию. Кислая реакция, белесоватый оттенок жидкости, наличие хлопьев, свидетельствует о примеси желудочного сока, такой материал не пригоден для исследования.
- Полученные порции желчи доставляют в лабораторию не позднее 1 -2 ч от момента получения, следя за тем, чтобы пробирки находились в строго вертикальном положении
Микробиологическое исследование грудного молока.
- Отбор проб грудного молока производится в поликлинике или стационаре в специально выделенном помещении.
- Перед сцеживанием молока женщина должна вымыть руки с мылом, тщательно обрабатывает соски и околососковую область молочных желез отдельными ватными тампонами, смоченными 700 спиртом (каждая железа обрабатывается отдельным тампоном).
- Молоко из правой и левой молочных желез собирается в отдельную посуду.
- Первые 5-10 мл сцеженного молока исследованию не подлежат.
- Последующие 3-5 мл сцеживаются в стерильные флаконы, которые закрываются стерильными пробками и доставляются в лабораторию не позднее 2-х часов в вертикальном положении во избежании опрокидывания и замачивания пробок.
- До момента исследования молоко должно храниться в холодильнике.
- Сцеженное накануне молоко исследованию не подлежит.
Правила забора и доставки материала от больных и контактныхв вирусологическое отделение МЛ ГЦГЭ.
Пробы от больных гриппом и ОРВИ
- Для вирусологического исследования отбирают при первом появлении клинических симптомов, т.е. в остром периоде заболевания (не позднее третьего дня), так как в этот период в носоглотке больного, а также в крови находится максимальное количество вируса.
- Пробы немедленно доставляют в вирусологическое отделение МЛ ГЦГЭ (ул. Короля,23, тел. 200-92-51).
- Материалом для исследования служат соскоб из носа и мазок из зева, а также сыворотки крови, взятые в начале болезни и в период выздоровления.
Соскоб из носа.
Необходимо предварительно очистить полость носа от слизи ( взрослым – высморкаться, детям – очистить с помощью ватных турунд). Тампон вводят на глубину 2-3- см до нижней раковины, затем слегка опускают книзу , вводят в нижний носовой ход под нижнюю раковину, делают вращательное движение на пол оборота, таким образом, чтобы в мазке было как можно больше эпителиальных клеток. Удаляют тампон вдоль наружной стенки носовой полости, опускают в пробирку с физиологическим раствором. Палочку обломать, флакон закрыть резиновой пробкой.
Для ранней диагностики краснухи выявляют антиген в клетках цилиндрического эпителия носа от больных или контактных. В качестве материала для исследования служит соскоб из нижнего носового хода (см.п.1- соскоб из носа).
Мазки из зева
Рекомендуется мазки делать до еды. Мазки отобрать при помощи сухого стерильного ватного тампона на палочке, которым протереть поверхность миндалин, задней стенки глотки и небных дужек. Тампон не должен касаться языка и слизистой полости рта. После взятия мазка тампон поместить в среду (розового цвета) во флакон из-под пенициллина, палочку обломать, флакон закрыть резиновой пробкой.
Кровь для серологических исследований
- Парные сыворотки исследуют для определения прироста титра антител к вирусам (во второй сыворотке по сравнению с первой).
- Первую кровь берут в самом начале заболевания, вторую – 10-14 дней спустя.
- Кровь в объеме не менее 1 мл берут в чистую центрифужную пробирку, отделяют сыворотку и помешают в пластиковую пробирку, которую хранят в морозильной камере до взятия второй сыворотки от того же больного.
- В вирусологическое отделение МЛ обе сыворотки доставляются одновременно.
- Результаты исследования зависят от качества доставляемого материала, от сроков забора и своевременной доставки в лабораторию.
Пробы фекалий
Для обследования контактных с рота -, энтеро-, полиовирусной инфекцииями забирают пробы фекалий массой 1-2 г. в чистый флакон.