Правила забора материала для микробиологического исследования

Правила забора материала для микробиологического исследования

Биологический материал целесообразно получать до начала антимикробной терапии.

• Материал для бактериологического исследования берут непосредственно из очага инфекции или исследуют клинически значимый биологический материал. 
• Необходимо соблюдать асептику, избегая контаминации биологического материала посторонней микрофлорой. 
• Количество материала должно быть достаточным для проведения исследования. 
• Собирают материал в стерильную посуду с пробками, полученную в микробиологической лаборатории: для взятия отделяемого из раны, мазков со слизистых оболочек, из глаза, уха, носа, зева, цервикального канала, влагалища, анального отверстия следует использовать стерильные ватные тампоны, для крови, гноя, спинномозговой жидкости и экссудатов используют стерильные шприцы и специализированные транспортные среды, для мокроты, мочи и кала - стерильные плотно закрывающиеся небьющиеся контейнеры.

Внимание: необходимо следить за сроками годности посуды, полученной в лаборатории. Если посуда, стерилизуемая в лаборатории, не использована в срок, указанный на этикетках её необходимо вернуть в лабораторию для повторной стерилизации.

• Нативный материал доставляют в лабораторию в максимально короткие сроки (для большинства образцов не позднее 1,5-2 ч после их получения). Допускается хранение материала в холодильнике при 4° С (это не относится к биологическому материалу, полученному из стерильных в норме локусов: ликвору, крови, внутрисуставной и плевральной жидкости!). 
• При использовании транспортных сред биологический материал можно хранить в течение 24 ч. 
• Жидкий биологический материал можно транспортировать непосредственно в шприце, на кончик которого надет стерильный колпачок или загнутая под углом игла. 
• Для исследования на анаэробы биологический материал необходимо помещать в анаэробные условия. Для жидких образцов (кровь, гной, экссудат, жидкости из стерильных полостей) используют специальные флаконы с жидкой питательной средой, заполненные газовой смесью определенного состава, куда из шприца уколом иглы через резиновую плотно завальцованную крышку вносят материал. Можно использовать анаэробные коммерческие тампоны с транспортной средой. 
• Транспортировка осуществляется в металлических биксах (пеналах), термоконтейнерах, которые должны легко подвергаться обработке. 
• К материалу прилагают сопроводительный до­кумент, где указывают наименование, источник и метод получения биологического материала, дату и время его взятия; ФИО, пол и возраст больного; название учреждения, отделения, № палаты; пред­полагаемый диагноз инфекционной патологии и предшествующую антибактериальную терапию; фамилию и подпись врача, направившего материал для проведения бактериологического исследова­ния.

Внимание: погрешности в правилах сбора материала для микробиологического исследования приводят к ошибкам в диагностике возбудителя и определении его антибиотикочувствительности.

Исследование крови

• Для взятия крови используют стерильные шприцы или системы для одноразового пользования. 
• Кровь берут во время подъёма температуры из периферической вены с соблюдением правил асептики и мер индивидуальной защиты, предусмотренных при работе с кровью (использовать резиновые перчатки). 
• Кровь засевают в питательные среды сразу после взятия у постели больного или процедурной. 
• Перед использованием флаконов визуально определяют прозрачность среды, любое помутнение свидетельствует об их непригодности. 
• При подозрении на анаэробную инфекцию необходимо одномоментно собирать кровь в два флакона – с питательными средами для аэробного и анаэробного культивирования. 
• Не следует брать кровь из сосудистых катетеров, кроме случаев, когда предполагается инфекция катетерного происхождения. 

Забор и посев крови
Для предотвращения контаминации кожу пациента над пунктируемой веной тщательно обработать следующей последовательности:

• 70% этиловым спиртом (или заменяющим его антисептиком) 
• 5% настойкой йода (или йодопирона, йодоната, хлоргексидина) начиная обработку от центра будущего прокола к периферии - 30 секунд 
• этиловым 70% спиртом (или заменяющим его антисептиком) 
• дают высохнуть обработанному участку кожи 
• не пальпируя вену повторно, производят венепункцию 
• вновь обрабатывают участок 70% этиловым спиртом (или заменяющим его антисептиком). 
• При аллергической реакции на йод кожу дважды обрабатывают 70% этиловым спиртом (или заменяющим его антисептиком). 

Использование сред, приготовленных в лаборатории:
Среды в стеклянных флаконах, закрытые стерильными ватно-марлевыми пробками и предохранительными стерильными бумажными колпачками:
 - двухфазная среда» (комбинация плотной и жидкой среды в одном флаконе) – для роста аэробных микроорганизмов
 - полужидкие специальные среды - для роста анаэробных микроорганизмов

• Посев осуществляют во флаконы со средами над пламенем спиртовой горелки. 
• Взятие и посев крови осуществляют два человека – в то время как один обрабатывает кожу пациента, пунктирует вену и берёт кровь, другой - над пламенем спиртовки
• Открывает пробки флаконов, подставляет флаконы со средой под струю крови из шприца или системы, обжигает горлышки и пробки флаконов и закрывает их. 
• Рекомендуемое соотношение объёмов крови и среды 1:10 (10 мл у взрослых, 5 мл у детей)

Использование коммерческих сред:
 - для аэробных микроорганизмов (с зелёной крышкой)
 - для анаэробных микроорганизмов (с красной крышкой)
 - педиатрические флаконы – (с жёлтой крышкой) для исследования крови в объёме до 5 мл

• Снимают предохранительную пластиковую крышку. 
• Дезинфицируют резиновую пробку флакона 70% этиловым спиртом (или заменяющим его антисептиком). 
• Дают просохнуть обработанной поверхности. 
• Прокалывают пробку флакона иглой шприца и производят посев крови. 
• Объём исследуемой крови по прилагаемой инструкции - обычно 10-30 мл для взрослых и 1- 5 мл для детей до 12 л (метка на этикетке флакона позволяет оценить объём взятой крови). 
• Сначала производят посев в «анаэробный» флакон, затем – в «аэробный» во избежание попадания воздуха из шприца. 
• Перемешивают осторожно круговыми движениями содержимое флакона. 
• Маркируют флаконы и до транспортировки в лабораторию содержат в термостате или при комнатной температуре в защищённом от света месте (не в холодильнике!!) 
• Исследования крови и других жидкостей организма с помощью анализатора культур крови BacT/ALERT-

При отсутствии в отделении флаконов для гемокультур.

• В исключительных случаях, при экстренной ситуации допускается использование 20-миллилитрового шприца с иглами. 
• В шприц предварительно набирают 0,5-0,7 мл стерильного гепарина. 
• Заменяют иглу. 
• Затем пунктируют вену, соблюдая правила асептики. Набирают 10-15- мл крови. 
• Перемешивают осторожным покачиванием с гепарином (иглу со шприца не снимают). 
• В этом же шприце с согнутой у основания иглой (или надетым стерильным колпачком) немедленно отправляют в лабораторию.

Исследование сосудистого катетера

• Исследуют при подозрении на инфекцию катетерного происхождения.
• В асептических условиях отрезают его дистальный (внутрисосудистый) конец около 5 см длиной. 
• Помещают в стерильный контейнер (пробирку). 
• Доставляют в лабораторию немедленно. 
• Важно не допускать высыхания образца. 

Исследование ликвора

• Спинномозговую жидкость получают при люмбальной пункции или пунции боковых желудочков мозга в объеме 3 -5 мл, помещают в стерильную, желательно центрифужную пробирку и немедленно доставляют в лабораторию.
• Полученную пробу доставить в лабораторию, избегая чрезмерного перегрева и особенно охлаждения (может быть использован термос). Охлаждение ликвора ниже 300 ведёт к гибели менингококков. 
• При невозможности немедленно доставить в лабораторию ликвор сохраняют при 370 в термостате. 
• При использовании коммерческих сред (BacT/ALERTFA и др.) свежевзятый ликвор в количестве 5-10 мл из шприца, проколов резиновую пробку, вносится во флакон со средой (см. исследование крови).

Исследование жидкостей организма из стерильных в норме полостей

• Исследуют перитонеальную, синовиальную, плевральную, суставную, перикардиальную жидкости. 
• Для бактериологического исследования используют жидкости, взятые при пункции и аспирации. 
• Попавшие в шприц пузырьки воздуха удаляют и помещают жидкость в анаэробную транспортную систему или отправляют её в шприце, предварительно сняв (или загнув) иглу или надевают на канюлю защитный стерильный колпачок. 
• Минимальный объём жидкости для выделения бактерий 1-5 мл, для выделения грибов или микобактерий не менее 10 мл. 
• Избыток жидкости или гной транспортировать в стерильных контейнерах с завинчивающейся крышкой. 
• Взятие материала тампоном не предохраняет анаэробы от воздействия кислорода воздуха, не позволяет приготовить качественный препарат для микроскопии, не гарантирует выделение культуры при незначительном количестве микробов в образце. 
• Не рекомендуется использовать антикоагулянты (цитрат, этилендиаминтетрауксусную кислоту), подавляющие рост некоторых видов бактерий. 
• При необходимости лучше использовать гепарин. 
• При достаточном количестве жидкости можно производить посев из шприца во флаконы со средой для гемокультур в соотношении 1:5 - 1:10 (5-10 мл). Однако при этом становится невозможной прямая бактериоскопия материала, а сроки идентификации удлиняются на сутки в сравнении с изолятами, выделенными при первичном посеве на плотные среды.

Исследование материала при раневой инфекции

• Взятие материала производит лечащий врач во время операции или перевязки. 
• В большинстве случаев исследуют поражённые ткани и аспираты. 
• Наиболее правильный способ взятия жидких материалов – объёмно с помощью стерильного шприца. Отбор материала тампоном производят только при невозможности осуществления объёмного метода. 
• Промыванием раневой поверхности физ. раствором удаляют местно применяемые антисептические и антибактериальные препараты.
• Кожу вокруг раны обрабатывают спиртом или другим антисептиком, некротические массы, детрит, гной удаляют стерильной сухой салфеткой. 
• Все ёмкости с отобранным материалом плотно закрывают стерильными пробками. 
• Доставляют в лабораторию в течение 1 часа. При невозможности доставить материал в течение этого времени, он должен храниться в холодильнике, но не более 2 часов.

Можно использовать специальные транспортные контейнеры и пробирки со средами. На транспортной среде материал хранится 24 часа.

Отделяемое открытых инфицированных ран
Материал берут двумя стерильными тампонами (один для посева, второй - для бактериоскопии) круговыми вращательными движениями от центра к периферии поражённого участка помещают в стерильную пробирку.

Отделяемое из дренажей.

• Берут стерильным шприцем и в количестве 1-2 мл помещают в стерильную пробирку или доставляют в шприце. 
• Можно использовать для исследования концы удалённых дренажных трубок 

Кусочки тканей
Помещают в другую плотно закрывающуюся стерильную ёмкость (пробирку), содержащую небольшое количество стерильного физ. раствора.
Глубокие раны или абсцессы.

• Поверхность раны дезинфицируют 70% этиловым спиртом, затем 1-2% йодным раствором. 
• Материал берут из глубины, избегая контаминации поверхностной микрофлорой раны. 

Биоптат с ожоговой поверхности
Поверхность раны дезинфицируют и берут образец с помощью пункционной биопсии (3-4 мм) для количественного исследования.
Язвы и узелковые утолщения

• Пораженную область кожи дезинфицируют, удаляют поверхностный слой и делают соскоб со дна язвы или узелкового утолщения. 
• Если имеется экссудат, его собирают шпри­цем или стерильным тампоном. 

Раны после укусов

• Гнойное содержимое из раны получают шприцем после надреза, дренирования или поверх­ностной обработки инфицированной раны. 
• При свежих укусах бактериологическое ис­следование не проводят, так как в этот период труд­но выделить этиологически значимый микроорга­низм. 

Кости

• Материал получают при оперативном вмеша­тельстве. Образец помещают в стерильный контей­нер без формалина и других консервантов. 
• Для предотвращения высыхания образца в контейнер может быть добавлен стерильный физ.­раствор.

Материал при инфекциях верхних дыхательных путей
Образцы из зева

• Исследуют прежде всего для выявления α-гемолитических стрептококов группы А, H.influenzae( при эпиглотитах).При наличии специфического анамнеза проводят исследование для исключения гонококковой этиологии фарингита. 
• Не следует брать материал при воспалённом надгортаннике, так как может возникнуть обструкция дыхательных путей! 
• Мазок из зева следует брать до еды или через 2 - 3 часа после приёма пищи. Перед взятием пробы больному необходимо прополоскать рот тёплой кипячёной водой. 
• Аккуратно прижимая язык шпателем, вводят стерильный тампон между дужками миндалин и язычком. 
• Движением тампона вперёд и назад собирают материал с задней поверхности глотки, миндалин и участков воспаления или изъязвления слизистой.
• Тампон помещают в стерильную пробирку, при необходимости используя транспортную среду. 

Внимание: При взятии пробы со слизистой зева (глотки) нельзя касаться щёк, языка, дёсен, а также собирать слюну.

Взятие материала при исследовании на возбудителей дифтерии.

• Для взятия материала используют стерильные ватные сухие тампоны. 
• Материал из ротоглотки и носа берут отдельными тампонами, натощак или не ранее, чем через 2 часа после еды, при хорошем освещении с использованием шпателя, не касаясь тампоном языка, слизистых щек и зубов. 
• При наличии налетов материал следует брать с границы пораженных и здоровых тканей, слегка нажимая на них тампоном. 
• Для взятия материала из носа используют один тампон, который вводят сначала в один, а потом в другой носовой ход, не касаясь крыльев носа снаружи 
• Необходимо обеспечить доставку материала в лабораторию не позднее 2-х часов, а при использовании глицериновых тампонов - в течение 4-х часов. 

Бактериологическое исследование носоглоточной слизи на менингококки

• Исследуемый материал берут из задней стенки носоглотки натощак или через 3 - 4 часа после еды стерильным ватным тампоном, укрепленным на изогнутой проволоке. 
• Материал берут с обязательным надавливанием шпателем на корень языка. Тампон вводят концом кверху за мягкое небо в носоглотку и проводят 2 -3 раза по задней стенке. 
• При извлечении тампон не должен касаться зубов, слизистой щек, языка и язычка. 
• Материал может быть взят смоченным тампоном, который затем доставляют в лабораторию. 
• Питательную среду для смачивания тампонов получают в бактериологической лаборатории. Можно использовать специальные транспортные среды. 
• Полученную пробу доставить в лабораторию, избегая охлаждения

Мазок со слизистой передних отделов полости носа.

• Исследование обычно проводится для выявления носительства метициллинрезистентных штаммов S.aureus. 
• Мазок со слизистой носа берут одним стерильным тампоном. 
• Тампон вводится сначала в здоровую ноздрю до упора на уровне носовой раковины и вращательными движениями собирают материал со слизистой. Повторяют процедуру в другом носовом ходе. 
• Тампон помещают в стерильную пробирку. 

Аспират из придаточных пазух

• Исследуют при бактериальных синуситах помимо исследования микрофлоры носовой полости. 
• Материал отсылают в лабораторию в анаэроб­ной транспортной среде или непосредственно в шприце. 
• He рекомендуется исследовать промывную жидкость из носоглотки, так как образцы контаминируются нормальной микрофлорой верх­них дыхательных путей, что не позволяет правиль­но трактовать результаты анализа. 
• При хронических синуситах возможен прицельный забор материала для микробиологического исследования с использованием эндоскопов. 

Исследование отделяемого уха
Жидкость при тимпаноцентезе

• Исследуют при среднем отите в случаях, если первичная терапия оказалась безуспешной или если тимпаноцентез проводился как лечебная процедура. 
• Очищают наружный слуховой проход слабым раствором детергента, после прокола барабанной перепонки врач-отоларинголог шприцем собирает жидкость и помещает ее в стерильный контейнер или отправляет в лабораторию в шприце с загнутой иглой или с защитным колпачком. 
• При невозмож­ности своевременной доставки целесообразно ис­пользовать транспортную среду. 
• При самопроизвольной перфорации барабан­ной перепонки экссудат собирают стерильным там­поном, используя слуховое зеркало. Однако в этом случае высока вероятность контаминации биологи­ческого материала эндогенной микрофлорой. 

Материал при воспалении наружного уха.

• Обрабатывают кожу 70% этиловым спиртом и промывают стерильным изотоническим раствором хлорида натрия (физраствором). 
• Материал из очага берут стерильным ватным тампоном. Тампон помещают в стерильную пробирку. 
• При поражении среднего и внутреннего уха исследуют пунктаты и материал, полученный во время оперативных вмешательств, собранные в стерильную пробирку или транспортную среду. 

Исследование отделяемого глаз.

• Накануне, за 6-8 часов (на протяжении ночи, предшествующей забору материала) отменяют все медикаменты и процедуры. 
• Материал забирают с пораженных мест в разгар воспалительного процесса с соблюдением правил асептики. 

Отделяемое с конъюнктивы

• Берут стеклянными стерильными палочками или платиновой петлей, предварительно фламбированной в пламени спиртовки и остуженной и погружают в 0,2 % сахарный бульон. 
• При наличии достаточно обильного гнойного отделяемого использую стерильные ватные тампоны (желательно коммерческие), которыми берут гной с внутренней поверхности нижнего века движением к внутреннему углу глазной щели. 
• Необходимо следить, чтобы при моргании ресницы не касались тампона (придерживать веки руками) 

Край век.
Корочки гноя удаляют пинцетом. Берут материал из язвочки у основания ресниц.
Роговица.

• Материал на исследование после обезболивания, можно взять платиновой петлёй или другим подходящим инструментом. 
• Если пациент применяет контактные линзы, необходимо исследовать их внутреннюю поверхность. 
• В кабинете врача производят посев на питательный бульон. 
• Пробы клинического материала доставить в лабораторию не замочив пробки, чтобы не исказить результат исследования.

Материал при инфекциях нижних дыхательных путей

Мокрота.

• Исследуют свободно откашливаемую мокроту, утреннюю порцию, натощак 
• Пациент предварительно должен почистить зубы, дёсны, язык, слизистую оболочку щёк зубной щёткой и прополоскать рот кипяченой водой. 
• Если мокрота отделяется плохо, накануне пациенту дают отхаркивающие средства или проводят ингаляцию физ. раствором. 
• Мокроту собирают в стерильную посуду с крышкой. 
• Сроки доставки мокроты в лабораторию не должны превышать 1,5-2 часа от момента её получения (допускается хранение в холодильнике, но не более 6 часов), т.к. задержка ведёт к аутолизу S.pneumoniae, а за счёт размножения бактерий-контаминантов меняется истинное соотношение микрофлоры бронхиального секрета. 

Качество собранной мокроты можно оценить по данным микроскопии нативных мазков по Граму.

При наличии в мазке мокроты более 10 эпителиальных клеток в поле зрения и менее 25 полиморфно-ядерных лейкоцитов (ПЯЛ) при малом увеличении микроскопа (объектив Х10) высока вероятность контаминации образца содержимым полости рта (слюной). Дальнейшее исследование такого материала нецелесообразно, материал необходимо взять повторно.

Трахеобронхиальные смывы

• Исследуют при отсутствии мокроты или невозможности её выделить естественным путём. 
• Специальным шприцем в трахею вводят около 10 мл стерильного физ. раствора и собирают откашливаемый смыв в стерильную посуду. 
• Бронхиальные смывы, в том числе вблизи очага воспаления, могут быть сделаны с помощью бронхоскопа. 
• Недостатком является очень часто значительное разведение трахеобронхиального содержимого, что снижает возможность выделения бактерий, а концентрация их падает примерно в 100 раз по сравнению с мокротой. 

Плевральная жидкость.

• Кожу перед пункцией обрабатывают 70% этиловым спиртом, затем спиртовой настойкой йода, затем опять спиртом. 
• После прокола жидкость собирают шприцем в сте­рильную пробирку и незамедлительно отправляют в лабораторию. 
• Допускается посев плевральной жидкости (по 5 мл) в аэробные и анаэробные флаконы, ис­пользуемые для исследования крови.

 Моча при инфекциях мочевыводящих путей 

• Исследуют утреннюю среднюю порцию (10-20мл) сво­бодно выпущенной мочи (за ночь концентрация бактерий в мочевом пузыре возрастает). 
• Не следует принуждать пациента к приему жидкости для фор­сирования диуреза, так как происходит разбавле­ние мочи и снижение числа бактерий. 
• Для сбора мочи используют стерильные ём­кости которые закрываются резиновой стерильной пробкой. Нельзя собирать мочу из мочеприемника или судна. 
• Перед взятием мочи проводят тщательный туалет наружных половых органов с мылом и кипяченой водой во избежание излишней ее контамина­ции при мочеиспускании нормальной микрофло­рой промежности. 
• Доставка мочи в лабораторию должна осу­ществляться в максимально короткие сроки. Посев следует проводить не позднее 2 ч после взя­тия материала либо в течение 8 ч при условии ее хранения в холодильнике. (При 4°С число бакте­рий в моче обычно остается стабильным в преде­лах 24 ч). 
• Взятие мочи следует повторить, если нет ус­ловий для ее хранения в холодильнике, и с момента взятия образца прошло более 2 часов, в противном случае результаты анализа могут быть недостовер­ными. 
• Недопустимо бактериологическое исследова­ние мочи, собранной в течение суток. 
• Не рекомендуется исследовать мочу, полу­ченную при наличии постоянного катетера 

Материал при инфекциях урогенитального тракта
Исследование отделяемого женских половых органов
Внимание: взятие материала для микробиологического исследования проводит акушер-гинеколог до проведения мануального исследования
Амниотическаю жидкость
Собирают через катетер, либо аспирируют при кесаревом сечении, либо пунктируют плодный пузырь.
Материал из уретры

• Собирают не ранее, чем через 1 ч по­сле мочеиспускания. 
• Отделяемое из уретры собирают стерильным ватным тампоном. 
• Если отделяемое получить не удается, наруж­ное отверстие уретры обмывают мылом и ополаски­вают кипяченой водой, вводят в уретру тонкий сте­рильный «уретральный» тампон на глубину 2-4 см, аккуратно вращают его в течение 2 сек., вынимают, по­мещают в соответствующую транспортную среду и доставляют в лабораторию. 

Материал из вульвы, преддверия влагалища

• Берут стерильным ватным тампо­ном.
• При воспалении бартолиниевых желез произ­водят их пункцию. 

Материал из влагалища.
После введения зеркала и подъемника во вла­галище материал собирают стерильным ватным тампоном с заднего свода или с патологически из­мененных участков.
Цервикальный канал.

• Обнажают шейку матки с помощью зеркал и влагалищную ее часть тщательно обрабатывают ватным тампоном, смоченным стерильным физрас­твором или стерильной водой. 
• Тонкий стерильный ватный тампон осторожно вводят в цервикальный канал, не касаясь стенок вла­галища, и берут материал. 
• Для бактериологческого исследования можно использовать соскоб слизистой, полученный при диагностическом выскабливании стенок цервикального канала.

Матка.

• Правильное взятие материала из матки может быть выполнено только при использовании специальных инструментов типа шприца-аспиратора., имеющего на зонде покрытие. 
• После прохождения зондом цервикального канала в полость матки раскрывают наружную оболочку зонда и набирают в шприц содержимое матки. 
• Материал из шприца помещают в стерильную пробирку. 

Придатки матки.
Материал из очага инфекции (гной, экссудат, кусочки ткани) получают при оперативном вмеша­тельстве или при диагностической пункции опухо­левидных образований, проводимой через влага­лищные своды.
Приготовление мазков для микроскопии.

• Помимо взятия материала на посев врач-гинеко­лог готовит мазки для микроскопии (не менее двух - для окраски по Граму и специальными метода­ми), используя отдельные стерильные тампоны или стерильные гинекологические инструменты. 
• Предметные стекла, предназначенные для приготовления мазков, маркируют. 
• Материал равномерно распределяют на пред­метном стекле осторожными движениями, избегая грубого втирания и резких штриховых движений инструментом. 
• Мазок высушивают при комнатной температу­ре, покрывают чистым предметным стеклом или по­мещают его в чашку Петри и отправляют в лаборато­рию. 
• Не допускается хранение влажного мазка между двумя стеклами. 

Исследование отделяемого мужских половых органов
Уретра.

• Материал собирают не ранее 2 часов после мочеиспускания. 
• Вводят в уретру тонкий стерильный ватный тампон на глубину 2- 4 см, аккуратно вращают его в течение 1-2 сек., вынимают, помещают в транспорт­ную среду и доставляют в лабораторию.

Исследование секрета простаты.

• Перед отбором проб необходимо тщательно вымыть наружные половые органы и область заднего прохода тёплой водой с мылом, затем сполоснуть тёплой водой. 
• Проводят массаж простаты через прямую кишку. Материал собирают в стерильную пробирку или стерильным ватным тампоном. 
• При наличии симптомов острого простатита массаж простаты не проводят. 
• Для получения более достоверных результа­тов можно дополнить это исследование бактерио­логическим исследованием мочи, полученной пе­ред и сразу после массажа простаты, что позволит выявить источник инфекции. Основным методом лабораторной диагностики простатита, позволяю­щим определить локализацию очага инфекции, яв­ляется метод Meares и Stamey: исследованию под­вергают первую порцию мочи, среднюю порцию мочи, секрет простаты и порцию мочи, полученные после массажа предстательной железы (так назы­ваемая 4-стаканная проба). 
• Пробы клинического материала доставить в лабораторию не замочив пробки, чтобы не исказить результат исследования.

Придатки яичек.
Материал собирают путем аспирации с помо­щью шприца и иглы.

Язва полового члена.

• Очищают поверхность язвы тампоном, смо­ченным физ.раствором. 
• Производят соскоб язвы до появления сероз­ной жидкости. 
• Стерильной салфеткой удаляют жидкость и органические наслоения (следует из­бегать кровоточивости). 
• Надавливают у основания язвы до появления прозрачной жидкости, аспирируют ее шприцем с тонкой иглой, закрывают иглу защитным колпач­ком и транспортируют в лабораторию.

Соскобы мочеиспускательного канала, шейки матки для исследования на урогенитальный хламидиоз

• Соскобы слизистых оболочек мочеиспускательного канала и шейки матки берут одноразовыми стерильными зондами, «щёточками», ложкой Фолькмана или аналогичными инструментами со слегка затуплёнными краями, соблюдая правила асептики и антисептики. 
• Наружные половые органы дезинфицируют, выделения удаляют тампонами или с помощью аспираторов. 
• При повышенной чувствительности слизистую оболочку предварительно анестезируют инстилляцией в мочеиспукательный канал 1-2 мл о.5% раствора дикаина. 
• Соскобы делают из глубины канала(до 6 см), со всех четырёх квадрантов. 
• Соскобы шейки матки берут после удаления слизистой пробки из глубины её канала, а также из влагалищной части шейки матки. 
• Соскобы берут осторожно, при лёгком надавливании. В материале должно быть возможно большее количество эпителиальных клеток и минимальное количество слизи, экссудата и примесей крови. 
• Соскобный материал распределяют тонким слоем на поверхность 8-миллиметровой лунки чистого обезжиренного предметного стекла так, чтобы все стороны тампона соприкасались с поверхностью стекла. 
• Мазок высушивают на воздухе 20-30 минут. 
• Допускается хранение мазка на стекле до фиксации 2-3 часа при комнатной температуре. 
• Мазки фиксируют соответственно методу окраски. 

Материал при исследовании на анаэробы
Общие показания к обследованию: сепсис неясной этиологии, гангрена, абсцессы, флегмона, перитонит, экссудативный плеврит, нагноения ран с подозрением на анаэробную инфекцию, гнойный артрит.
Образцы клинического материала для исследования на анаэробы во избежания контакта с атмосферным воздухом получают при использовании инвазивных методов забора. 

Исследуемые материалы: кровь, плевральная, перитонеальная и сино­виальная жидкости, гной из абсцессов и других закрытых полостей (если объем гноя превышает 2 мл, то в пробирке под резиновой пробкой сохраняются относительно ана­эробные условия в течение нескольких часов), материалы из глубоких отделов свища (после очистки и асептической обработки наружного от­верстия) и ран. 

Если нет возможности использо­вать метод аспирации шприцем, материал берут стерильным ватным тампоном, который помещают в анаэробную транспортную среду сохранения и до транспортировки в лабораторию содержат при ком­натной температуре;
Фрагменты костной и мышечной тканей размером 1x1 см, взятые из глубокого очага воспаления во время операции (если сроки доставки мате­риалов в лабораторию превышают 15-20 мин, фрагменты тканей погружают в небольшой объем стерильного физраствора).
Не подлежат исследованию на анаэробы: отделяемое поверхностных ран и язв, мазки из зева, носа и ротовой полости,мазки из влагалища и цервикального канала, мокрота и бронхиальные смывы, моча (кроме мочи, полученной надлобковой пункцией мочевого пузыря), содержимое желудка, тонкого и толстого ки­шечника, фекалии (за исключением предполагаемой Clostridium difficile-ассоциированной диареи).

Исследование фекалий на патогенные и условно-патогенные энтеробактерии и дисбактериоз.

• При исследовании на дисбактериоз пациент за 1-3 дня до взятия пробы должен находиться на диете, исключающей приём продуктов, усиливающих процессы брожения в кишечнике, а также алкоголь, антимикробные лекарственные препараты и т. п. 
• Фекалии собирают сразу после дефекации из предварительно обработанного дез. раствором и тщательно промытого водой судна, горшка, специального лотка или с пеленки с помощью стерильной стеклянной палочки, проволочной петли или деревянного шпателя. 
• Порцию фекалий помещают в стерильный флакон. 
• Объём испражнений для исследования на патогенные энтеробактерии, флору и на дисбактериоз должен составлять 1/3 флакона, объёмом 20 мл. 
• При наличии в испражнениях патологических примесей (слизь, хлопья, гной) их следует включать в исследуемую пробу. 
• Материал доставляется в лабораторию в кратчайшие сроки 
• Испражнения для исследования на патогенные энтеробактерии можно получить непосредственно из прямой кишки с помощью ректальных, ватных или ватно - марлевых тампонов, укрепленных на металлической или деревянной палочке, вводя их круговыми движениями в прямую кишку на 6-8 см. 

Исследование желчи (дуоденального содержимого) при инфекциях желчевыводящих путей

• Желчь собирают при зондировании в проце­дурном кабинете отдельно по порциям: А, В и С (соответственно дуоденальное содержимое, пузырную желчь и желчь из желчных протоков) в три стерильные пробирки, либо во время оператив­ного вмешательства с помощью шприца в одну про­бирку. 
• Дуоденальное содержимое и желчь имеют зеленовато - желтый цвет и щелочную реакцию. Кислая реакция, белесоватый оттенок жидкости, наличие хлопьев, свидетельствует о примеси желудочного сока, такой материал не пригоден для исследования. 
• Полученные порции желчи доставляют в ла­бораторию не позднее 1 -2 ч от момента получения, следя за тем, чтобы пробирки находились в строго вертикальном положении

Микробиологическое исследование грудного молока.

• Отбор проб грудного молока производится в поликлинике или стационаре в специально выделенном помещении. 
• Перед сцеживанием молока женщина должна вымыть руки с мылом, тщательно обрабатывает соски и околососковую область молочных желез отдельными ватными тампонами, смоченными 700 спиртом (каждая железа обрабатывается отдельным тампоном). 
• Молоко из правой и левой молочных желез собирается в отдельную посуду.
• Первые 5-10 мл сцеженного молока исследованию не подлежат. 
• Последующие 3-5 мл сцеживаются в стерильные флаконы, которые закрываются стерильными пробками и доставляются в лабораторию не позднее 2-х часов в вертикальном положении во избежании опрокидывания и замачивания пробок. 
• До момента исследования молоко должно храниться в холодильнике. 
• Сцеженное накануне молоко исследованию не подлежит.

Правила забора и доставки материала от больных и контактныхв вирусологическое отделение МЛ ГЦГЭ.
Пробы от больных гриппом и ОРВИ

• Для вирусологического исследования отбирают при первом появлении клинических симптомов, т.е. в остром периоде заболевания (не позднее третьего дня), так как в этот период в носоглотке больного, а также в крови находится максимальное количество вируса. 
• Пробы немедленно доставляют в вирусологическое отделение МЛ ГЦГЭ (ул. Короля,23, тел. 200-92-51). 
• Материалом для исследования служат соскоб из носа и мазок из зева, а также сыворотки крови, взятые в начале болезни и в период выздоровления. 

Соскоб из носа.
Необходимо предварительно очистить полость носа от слизи ( взрослым – высморкаться, детям – очистить с помощью ватных турунд). Тампон вводят на глубину 2-3- см до нижней раковины, затем слегка опускают книзу , вводят в нижний носовой ход под нижнюю раковину, делают вращательное движение на пол оборота, таким образом, чтобы в мазке было как можно больше эпителиальных клеток. Удаляют тампон вдоль наружной стенки носовой полости, опускают в пробирку с физиологическим раствором. Палочку обломать, флакон закрыть резиновой пробкой.
Для ранней диагностики краснухи выявляют антиген в клетках цилиндрического эпителия носа от больных или контактных. В качестве материала для исследования служит соскоб из нижнего носового хода (см.п.1- соскоб из носа).
Мазки из зева
Рекомендуется мазки делать до еды. Мазки отобрать при помощи сухого стерильного ватного тампона на палочке, которым протереть поверхность миндалин, задней стенки глотки и небных дужек. Тампон не должен касаться языка и слизистой полости рта. После взятия мазка тампон поместить в среду (розового цвета) во флакон из-под пенициллина, палочку обломать, флакон закрыть резиновой пробкой.

Кровь для серологических исследований

• Парные сыворотки исследуют для определения прироста титра антител к вирусам (во второй сыворотке по сравнению с первой). 
• Первую кровь берут в самом начале заболевания, вторую – 10-14 дней спустя. 
• Кровь в объеме не менее 1 мл берут в чистую центрифужную пробирку, отделяют сыворотку и помешают в пластиковую пробирку, которую хранят в морозильной камере до взятия второй сыворотки от того же больного. 
• В вирусологическое отделение МЛ обе сыворотки доставляются одновременно. 
• Результаты исследования зависят от качества доставляемого материала, от сроков забора и своевременной доставки в лабораторию. 

Пробы фекалий
Для обследования контактных с рота -, энтеро-, полиовирусной инфекцииями забирают пробы фекалий массой 1-2 г. в чистый флакон.